Sintesis Peptida yang Sulit & Hidrofobik

Sintesis Peptida yang Sulit|Kustomisasi Peptida Hidrofobik|Sintesis Peptida yang Sulit|Sintesis Urutan Cluster|Sains-Peptida

Urutan peptida terlalu hidrofobik? Agregat dengan mudah? Beberapa pasang ikatan disulfida? Sains-Layanan Sintesis Peptida Sulit dan Sintesis Peptida Hidrofobik Peptida berspesialisasi dalam segala jenis "tidak dapat menyelesaikannya". 20 pengalaman bertahun-tahun, sistem pelarut khusus, pengiriman stabil. Jangan ragu untuk menghubungi kami.

Peptida jenis apa yang dianggap "sulit"?
Setelah berkecimpung dalam bisnis sintesis peptida selama 20 tahun, saya telah melihat semua jenis peptida yang sulit. Ketika pelanggan datang kepada kami, mereka sudah bertanya kepada beberapa perusahaan, dan jawaban yang mereka dapatkan adalah "Saya tidak bisa" atau "Cobalah, tidak ada jaminan".

Peptida dengan hidrofobisitas kuat: daerah transmembran, peptida sinyal, asam amino hidrofobik, bila disintesis akan menggumpal pada resin, dan asam amino di belakangnya tidak akan bisa masuk.
Peptida yang mudah diagregasi, seperti peptida amiloid dan antimikroba, menumpuk saat disintesis dan menyumbat kolom saat dimurnikan.
Peptida dengan banyak pasang ikatan disulfida: lebih dari tiga pasang, satu langkah salah dalam urutan pasangan dan seluruh molekul hancur.
Peptida panjang: lebih dari 60 asam amino, setiap langkah hasilnya menurun, dan pada akhirnya tidak ada yang tersisa.
Kombinasi modifikasi yang kompleks: fosforilasi, fluoresensi, siklisasi, dan kondisi yang saling bertarung.
Kita bisa mengambil semuanya, dan ini bukan "mencoba", melainkan "punya rencana".

1. Peptida hidrofobik: dengan sistem pelarut khusus
Kesulitan peptida hidrofobik terletak pada kenyataan bahwa mereka tidak dapat dilarutkan dalam pelarut konvensional, dan ketika disintesis, rantai peptida "mengumpul" pada resin, sehingga asam amino di belakangnya tidak mungkin masuk.

Solusi kami:
Kombinasi pelarut khusus: sistem campuran DMF, NMP, DCM, ditambah sedikit zat pelepas cairan, sehingga rantai peptida tetap teregang.
Optimalisasi suhu: beberapa reaksi lebih baik pada 40 derajat daripada suhu ruangan, beberapa harus diturunkan hingga 0 derajat, kami telah mencobanya satu per satu.
Pemilihan resin: Gunakan resin dengan kelarutan tinggi untuk peptida hidrofobik guna memberikan ruang yang cukup untuk rantai peptida.
Label terlarut: Jika tidak bisa, tambahkan label hidrofilik dan potong setelah sintesis.

Kasus nyata: peptida transmembran 35aa, asam amino hidrofobik menyumbang 70%, pelanggan mencari tiga perusahaan tidak dapat dilakukan. Kami mengubah sistem pelarut dan menambahkan label pelarut, akhirnya kemurniannya menjadi 92%, dan pelanggan melakukan studi struktur dengan lancar.

2. Beberapa pasang ikatan disulfida: tidak berhasil, strategi
Semakin banyak ikatan disulfida, semakin sulit untuk memasangkannya. Dua pasang boleh saja, tetapi tiga pasang atau lebih, dan satu langkah salah maka semuanya berakhir.
Strategi kami:
Perlindungan ortogonal: Cys dapat dibuka dan dipasangkan secara bertahap menggunakan kelompok pelindung yang berbeda, seperti Trt, Acm, tBu.
Optimalisasi kondisi oksidasi: oksidasi udara, oksidasi glutathione, oksidasi yodium, metode berbeda untuk peptida berbeda.
QC Menengah: Setelah setiap pasangan, ambil sampel untuk MS dan konfirmasikan pasangan tersebut sebelum melanjutkan.
Konfirmasi MS/MS (opsional): pemisahan akhir-dengan spektrometri massa sekunder untuk melihat di mana sebenarnya ikatan disulfida terikat.

A real case: A conotoxin peptide containing four pairs of disulfide bonds was rejected by many companies. We designed a four-step oxidation strategy, which took six weeks, and delivered >Kemurnian 90%, ikatan disulfida berpasangan dengan benar, dan struktur kristal kemudian diselesaikan oleh pelanggan.

3. Peptida yang rawan agregasi-: mensintesis sambil bertahan
Beberapa peptida secara alami suka berkumpul, seperti protein amiloid dan peptida antibakteri. Mereka mulai berkumpul ketika disintesis, menghalangi kolom ketika dimurnikan, dan tidak dapat larut ketika berada di tangan.
Solusi kami:
Pseudoprolin: Pseudoprolin dimasukkan pada posisi Ser/Thr untuk mengganggu kecenderungan agregasi dan berubah kembali setelah sintesis.
Sintesis segmental: Peptida yang terlalu terpolimerisasi dipotong menjadi beberapa segmen dan disintesis secara terpisah, lalu disambung kembali pada akhirnya.
Optimalisasi kondisi pemurnian: suhu tinggi, pH asam, penambahan pelarut organik untuk menemukan kondisi yang menjadikannya non-polimerisasi.

4. Kombinasi pengubah kompleks: kondisi tanpa perlawanan
Beberapa peptida memiliki beberapa persyaratan: fosforilasi, pelabelan fluoresen, dan siklisasi. Modifikasi ini mungkin bertentangan satu sama lain - misalnya, fosforilasi bersifat asam-fobia, pelabelan fluoresen bersifat ringan-fobia, dan siklisasi memerlukan pH tertentu.
Pendekatan kami:
Rancangan strategi konservasi: pemangkasan mana yang harus dilakukan terlebih dahulu, pemangkasan mana yang akan dilakukan belakangan, dirancang terlebih dahulu.
Kondisi ortogonal: Kondisi setiap langkah reaksi tidak mempengaruhi modifikasi yang telah dilakukan.
QC Menengah: Setelah setiap langkah modifikasi, ambil sampel untuk memastikannya dilakukan dengan benar sebelum melanjutkan.

5. Kemurnian: Tergantung pada Apa yang Anda Lakukan dengannya

Setiap peptida disertai dengan laporan HPLC dan MS, menjadikan data kemurnian transparan.

1. Kami telah melakukan ini selama 20 tahun
Sintesis Peptida yang Sulit bukanlah sesuatu yang dapat dilakukan oleh siapa pun. Selama bertahun-tahun, kami telah menangani banyak peptida yang sulit: protein transmembran, peptida fusi virus, konotoksin, protein amiloid, peptida antimikroba, dll. Kami memiliki gagasan bagus tentang urutan mana yang rentan terhadap masalah, dan kondisi mana yang mampu menyelamatkannya. Setidaknya Anda tidak perlu mencoba semuanya jika Anda datang kepada kami untuk Sintesis Peptida Hidrofobik yang sulit.

2. Ini bukan "mencoba", ini "memiliki program".
Banyak perusahaan yang menggunakan peptida sulit dan berkata, "Kami akan mencobanya, tapi kami tidak menjaminnya". Kami tidak bermain seperti itu. Sebelum menerima pesanan, kami akan mengevaluasi urutannya, berapa proporsi asam amino hidrofobik, apakah diketahui kecenderungan agregasi, berapa pasang ikatan disulfida, dan apakah modifikasinya rumit atau tidak. Setelah evaluasi, kami akan memberi tahu Anda: berapa tingkat keberhasilannya dan berapa lama waktu siklusnya.

Kami tidak menerima perintah yang tidak dapat dilaksanakan, dan kami harus menyerahkan pesanan yang telah kami terima.

3. Sistem pelarut khusus untuk hidrofobisitas
Peptida hidrofobik adalah keunggulan kami. Jika pelarut konvensional tidak dapat larut, kami akan mengganti pelarutnya; jika suhu konvensional tidak bereaksi, kami akan menyesuaikan suhunya; jika resin konvensional tidak tahan, kami akan mengganti resin. Ada juga label pelarut sebagai jalan keluarnya.

4. Beberapa pasang ikatan disulfida, langkah-demi-langkah
Jika terdapat lebih dari tiga pasang ikatan disulfida, kita akan mengambil pendekatan langkah demi langkah: langkah pertama adalah melindungi A dan membuka pasangan pertama; lindungi B dan buka pasangan kedua; lindungi C dan buka pasangan ketiga. Setelah setiap langkah, kami mengambil sampel untuk MS dan mengonfirmasi pemasangan sebelum melanjutkan. Akhirnya, MS/MS akan dipecah dan diverifikasi, dan data akan diberikan kepada Anda tanpa Anda duga.

5. Kontrol kualitas: data di setiap langkah
Pengendalian mutu peptida sulit perlu lebih hati-hati:
QC Menengah: Setelah setiap fragmen dan setiap langkah modifikasi, ukur kemurnian dan berat molekul terlebih dahulu.
Produk akhir: HPLC untuk kemurnian, MS untuk berat molekul.
Uji kelarutan: Berikan pelarut dan metode pelarutan yang direkomendasikan, sehingga Anda tidak mendapatkan peptida yang tidak larut.
Melakukan Sintesis Peptida Hidrofobik yang sulit, data berbicara sendiri, setiap langkah dapat dilacak.

• Bentuk pengiriman: bubuk lyophilized, tabung centrifuge atau botol.
• Dokumen yang menyertai:COA (profil HPLC + spektrum MS), laporan sintesis (opsional).
• Tes opsional: kandungan peptida, endotoksin, kelembaban, komposisi asam amino, uji kelarutan.
• Kemasan yang Disesuaikan: membagi porsi dan menandai sesuai dengan kebutuhan Anda.
• Setiap produk Sintesis Peptida Hidrofobik yang sulit ditinjau untuk memastikan urutannya benar dan kemurniannya memenuhi standar sebelum dikirim.

Apakah Anda ditolak oleh orang lain, atau Anda tidak dapat melakukannya di lab Anda sendiri, Anda dapat berbicara dengan kami. Jika Anda sedang mencari Sains-Peptida untuk melakukan Sintesis Peptida Hidrofobik yang sulit, setidaknya Anda tidak perlu mencoba satu per satu.

Saya ingin Anda memberi tahu saya:
Urutan peptida (atau informasi target)
Pernahkah Anda memiliki orang lain yang melakukannya sebelumnya? Apa hasilnya?
Berapa banyak (miligram)
persyaratan kemurnian

Kapan kamu menginginkannya?

Memberi Anda penilaian kelayakan dan penawaran program dalam waktu 24 jam.